immunoelektrofores

De immunoelektrofores används för laboratoriediagnostisk detektion av monoklonala antikroppar i patientens blod. Monoklonala antikroppar härrör från samma cell och riktas mot samma antigener. Av denna anledning ska de bedömas som patologiska och, om de bevisas, tala för sjukdomar som Waldenströms sjukdom.

Vad är immunoelektrofores?

Joner har olika rörlighet. Denna olika rörlighet utgör grunden för elektropheresproceduren. Dessa metoder skiljer olika ämnen från varandra med hjälp av elektriska fält och tyngdkraft. En välkänd metod inom området är immuno-elektroferes.

Detta är en kvalitativ diagnostisk metod som används för att detektera monoklonala antikroppar. Antikroppar är immunologiskt aktiva proteinsubstanser från en specifik cellinje. Monoklonala antikroppar är alla baserade på samma B-lymfocyter och är därför riktade mot en enda epitop. Varje naturligt immunsvar på invaderande antigener motsvarar ett polyklonalt svar och är därför riktat mot olika epitoper. Ett monoklonalt immunsvar ger därför indikationer på patologiska kroppsprocesser.

Monoklonala antikroppar binder olika molekyler med hög specificitet. Denna bindning kan demonstreras med hjälp av immunoelektrofores. Proceduren är en kvalitativ procedur inom laboratoriediagnostik och består av de två typerna av procedurer, serumelektrofores och immunodiffusion.

Funktion, effekt och mål

Immunoelektrofores kombinerar metodiken för serumelektrofores med immunodiffusion. Patientens serum placeras på en agarosgel eller cellulosaacetatfilm. Ett kontrollserum appliceras också. Appliceringen följs av en elektroforetisk separering av proverna. Antisera, IgG, IgA, IgM, ättiksyra för normal elektrofores och kappa och lambda appliceras mellan skiljelinjerna.

Detta skapar en reaktion med antikropparna i patientens serum, vilket skapar fällningslinjer. Beroende på antiserummet som används och de individuella linjernas placering och form, kan slutsatser dras om immunoglobulinerna innehållande lätta kedjor kappa eller lambda. För ett lambdaband finns det fria lätta kedjor som består av antikroppar. Laboratoriet ger ytterligare bevis via det sällsynta IgE och IgD, vilket möjliggör en exakt bestämning av immunoglobulinerna. En metod för immunodiffusionelektrofores sker enligt Pierre Grabar och Curtis Williams och motsvarar en kombination av agarosgelelektrofores av proteiner och antikroppsdiffusion.

Först sker agarosgelelektrofores. Därefter diffunderar de innehållande antikropparna mot antigenbanden och skapar därmed fällningsbågar. Detta ska särskiljas från raketimmunoelektrofores enligt Laurell, vilket motsvarar elektroforeserna av proteiner i en agarosgel, var och en har antikroppar i en viss koncentration. Det finns en något basisk buffert i gelen, som endast tillåter antigenen att migrera och som driver de flesta antikroppar till den isoelektriska punkten genom exponering för det något basiska pH-värdet tills de slutar röra sig elektroforetiskt.

I början av en raketimmunoelektrofores finns ett överskott av antigen, så att lösliga antigen-antikroppskomplex bildas. Under elektrofores finns det också bindning mellan antigener och andra antikroppar. På detta sätt bildas immunutfällningar vid ekvivalenspunkten, som liknar raketliknande figurer med en höjd som är proportionell mot antigenkoncentrationen. Fällningens höjd mäts för att utvärdera testet.

Du hittar din medicin här

Risker, biverkningar och faror

Detekteringen av monoklonala antikroppar är av särskild betydelse för diagnosen multipel myelom och Waldenströms sjukdom. De bevis som lämnats talar för en malign degeneration av immunceller. Multipelt myelom motsvarar en cancer i benmärgen, som kännetecknas av den maligna multiplikationen av antikroppsproducerande celler i plasma.

Dessa plasmaceller producerar antikroppar och deras fragment. Maligna plasmaceller kommer alltid från en vanlig föregångare och är därför genetiskt identiska. De producerar endast monoklonala antikroppar. Sjukdomens malignitet kan motsvara ett förstadier men kan också nå ett mycket malignt stadium, som utan behandling är snabbt dödligt. Symtom på sjukdomen härrör från cellernas maligna tillväxt eller från antikroppar och antikroppsfragment. De vanligaste symtomen inkluderar bensmärta, benupplösning och spontana frakturer.

Kalciumnivån i blodet ökar ofta. Dessutom deponeras de onormala antikropparna ofta i vävnaden och orsakar funktionella störningar i organen, vilket kan leda till symtom som njursvikt eller försämrat blodflöde. Waldströms sjukdom är också en ondartad tumörsjukdom. Mer exakt är det en ondartad lymfomsjukdom som räknas bland de långsamt framstegande och nästan asymptomatiska lymfom som inte är Hodgkin. I de flesta fall kan onormal produktion av monoklonalt IgM på grund av aktiviteten hos de maligna lymfomcellerna detekteras i sjukdomen.

Waldenströms sjukdom är extremt lik multipel myelom i dess egenskaper, men visar vanligtvis en mer gynnsam kurs. De flesta patienter med Waldenströms sjukdom är till stor del asymptomatiska när de diagnostiseras. Andra patienter uppvisar tidigt symptom, såsom icke-specifik trötthet eller perifera neuropatier, som orsakas av avsättning av monoklonalt IgM i myelinhöljet. Även små mängder IgM kan utlösa polyneuropati. Ingen polyneuropati förekommer hos andra patienter, inte ens vid höga nivåer. Dessutom kan ospecifika symtom som feber, oönskad viktminskning eller nattsvett uppstå. Bensmärta är också karakteristiskt.

På grund av överproduktionen av IgM blir blodet hypervisk, så att de nämnda symtomen kan förknippas med de med ett hyperviskositetssyndrom. I de flesta fall manifesterar sig denna blödningstendens i ofta näsblödningar, huvudvärk, generell obehag eller suddig syn och akustiska klagomål. För att detektera maligna sjukdomar av denna typ har immunoelektroföres länge blivit en standarddiagnostisk procedur.